פיפטות וטיפים לפיפטה

הפיפטה היא נקודת הכשל הכי שקטה במעבדה
שגיאה של אחוזים בודדים בנפח מתגלגלת ישירות לתוצאה, ובדילול סדרתי היא מצטברת ומתעצמת. הבעיה היא שפיפטה שיצאה מכיול אינה נראית שונה — היא ממשיכה לעבוד, פשוט לא נכון. פיפטה שנפלה, שאוחסנה שוכבת, שנשאב לתוכה נוזל או שלא כוילה שנים יכולה לסטות עשרות אחוזים בלי שום סימן חיצוני.
לכן נדרש כיול תקופתי מתועד — בדרך כלל אחת לשנה, ובעבודה אינטנסיבית או בבדיקות קריטיות בתדירות גבוהה יותר. בין הכיולים אפשר לבצע בדיקת שקילה פשוטה: שוקלים מים מזוקקים שנשאבו בפיפטה ומשווים לנפח הצפוי.

טכניקה נכונה — מה שבאמת משנה
מחזיקים את הפיפטה אנכית בשאיבה ובזווית של כ-45 מעלות בשחרור. שואבים ומשחררים בקצב אחיד ואיטי, במיוחד בנפחים גדולים — שאיבה מהירה מכניסה בועות. ולפני כל סדרת מדידות מבצעים רטיבות מוקדמת: שואבים ומשחררים את הנוזל שלוש פעמים כדי לרוות את פנים הטיפ באדים. דילוג על השלב הזה גורם לסטייה שיטתית כלפי מטה בנפח הראשון.
אחסון: תמיד אנכית על מעמד. פיפטה ששוכבת מאפשרת לנוזל שנשאב בטעות לזרום אל הבוכנה והקפיץ — הסיבה הנפוצה ביותר לפיפטה שיוצאת מכיול.

טיפים: לא כולם שווים
טיפ אוניברסלי מתאים לעבודה שגרתית. טיפ מסנן מכיל מחסום שחוסם אירוסול מלהגיע לחרוט הפיפטה — הגורם המרכזי לזיהום צולב בעבודת PCR. טיפ בעל אטימה עצמית נאטם לחלוטין ברגע שנוזל מגיע למסנן, ומגן על הפיפטה גם משאיבת יתר בטעות.
דרגות ניקיון: **Eppendorf Quality** לעבודה שגרתית; **PCR clean** מאושר כנטול DNA אנושי ואנזימים מפרקי חומצות גרעין; **Biopur** הוא הגבוה ביותר — סטרילי ונטול ATP, DNA ופירוגנים, לתרביות תאים ולדגימות שאין להן תחליף.

כרית אוויר מול הזזה ישירה
פיפטת אוויר רגילה עובדת על כרית אוויר בין הבוכנה לנוזל. הכרית מתכווצת ומתרחבת לפי צמיגות הנוזל ולחץ האדים שלו, ולכן בנוזלים צמיגים כמו גליצרול או בממסים נדיפים המדידה מאבדת דיוק. דיספנסר בהזזה ישירה, שבו הבוכנה נמצאת בתוך הטיפ ונוגעת בנוזל, מבטל את הבעיה — ובנוסף מאפשר לחלק עשרות מנות משאיבה אחת.

שאלות נפוצות

כל כמה זמן מכיילים פיפטה?
לפחות אחת לשנה, ומיד אחרי נפילה או חשד לתקלה. במעבדות הפועלות לפי נהלי איכות הכיול מתועד ומבוצע על ידי גורם מוסמך.

מתי חייבים טיפ מסנן?
בכל עבודה מולקולרית, בתרביות תאים, בדגימות זיהומיות ובכל מקרה שבו זיהום צולב פוסל את התוצאה. בעבודה שגרתית עם מים ותמיסות בופר טיפ אוניברסלי מספיק.

האם אפשר לעקר טיפים באוטוקלב?
טיפים אוניברסליים רבים ניתנים לעיקור, וקופסאות הטיפים מיועדות לכך. טיפים סטריליים מראש אינם דורשים עיקור נוסף, וטיפי מסנן אינם מיועדים לעיקור חוזר — החום פוגע במסנן.

למה אסור לשאוב בפה?
שאיבה בפה גרמה בעבר להרעלות ולהדבקות בפתוגנים, והיא אסורה בכל נוהל בטיחות מעבדתי מודרני. כדור פיפטציה או עזר שאיבה הוא החלופה הזולה והבטוחה.